TGF- przełącza się z supresora nowotworu na czynnik prometastatyczny w modelu progresji raka piersi ad 5

Aby określić wpływ zredukowanego TGF-. reagując na rakotwórczość różnych linii komórkowych in vivo, ksenopotokowaliśmy wszystkie cztery komórki i ich pochodne wyrażające DNR w bezgrasiczych myszach nagich. Dla MI unieśmiertelnione. Normalne. linia komórek nabłonka piersi, brak zmian utworzonych do roku po wstrzyknięciu, niezależnie od tego, czy wyrażały one DNR (w sumie sześć miejsc wstrzyknięć dla każdej z grup genotypu DNR i CON, dane nie przedstawione). Wynik ten sugeruje, że utrata TGF-. odpowiedź nie jest zdarzeniem inicjującym dla karcynogenezy piersi. Dla linii komórkowej M-II, która jest rakotwórczą linią prenokreśleniową zainicjowaną przez HRAS, określano rakotwórczość zarówno dla puli transdukowanych komórek, w których TGF-a. odpowiedź była w pełni zablokowana (pula DNR) i klon, który wykazał resztkowe TGF-. reaktywność (DNR c103) (rysunek 3a). W trakcie eksperymentu nie powstały żadne wyczuwalne zmiany chorobowe w komórkach rodzicielskich (nie pokazano), ani w komórkach transdukowanych kontrolnym retrowirusem (Figura 3b). W 17% miejsc wstrzyknięcia (3 z 18), torbielowate struktury przewodowe lub hiperplazje zaobserwowano po 120 dniach, ale nie zaobserwowano guzów (Figura 3c, CON). Natomiast komórki DNR M-II tworzyły szybko rosnące uszkodzenia z opóźnieniem, które zależało od poziomu skuteczności DNR. Dla puli transdukowanych komórek DNR bez odpowiedzi hamującej wzrost na TGF-y, wyczuwalne zmiany chorobowe wykryto z opóźnieniem około 40 dni (Figura 3a). Po 65 dniach mierzalne zmiany występowały w sześciu z dziesięciu miejsc iniekcji. Histologicznie, utworzone zmiany były rakiem gruczołowym lub brodawkowatym (Figura 3c, DNR). Różnica w częstości guza między grupami CON i DNR była statystycznie istotna (P <0,001, dokładny test Fishera). Podobne wyniki otrzymano w drugim niezależnym eksperymencie (dane niepokazane). W przypadku klonów transdukowanych DNR komórek, w których odpowiedź hamująca wzrost była tylko częściowo zablokowana (klon DNR 103), pojawiły się guzy z dłuższym latencją (63 dni), ale podobną częstością (siedem z dziesięciu) (Figura 3b). Podsumowując, dane te wskazują, że zmniejszone TGF-a Reaktywność może współdziałać z początkową zmianą onkogenną w celu zwiększenia częstotliwości złośliwej transformacji komórki nabłonkowej sutka. Ta obserwacja jest zgodna z rolą supresora nowotworów dla TGF-a. w przednowotworowym nabłonku piersi. Utrata TGF-. odpowiedź zwiększa agresywność niskiego stopnia raka piersi. Linia komórek M-III tworzyła wolno rosnące nowotwory po ksenoprzeszczepie na nagich myszach (Figura 4a). Dla porównania guzy utworzone przez komórki DNR M-III miały krótsze opóźnienie (około 14 dni w porównaniu z około 25 dniami) i rosły szybciej (Figura 4a). Średnia waga nowotworu po 30 dniach po wstrzyknięciu wynosiła 1,9. 1,2 g dla nowotworów DNR M-III i 0,48. 0,56 g dla nowotworów M-III CON (P = 0,003, test dwustronny t dla niezależnych próbek). Wynik ten został potwierdzony przez dwa dodatkowe niezależne eksperymenty (dane niepokazane). Ryc. 4Zmniejszone TGF-. Reaktywność zwiększa szybkość wzrostu guza i stopień histologiczny niskiej jakości linii raka piersi M-III. (a) Kinetyka wzrostu guza. Nagie myszy inokulowano podskórnie na każdym tylnym boku za pomocą retrowirusowo transdukowanych komórek M-III (106 komórek / miejsce, 10 miejsc / genotyp). Nieprzytłumaczone macierzyste komórki M-III (n = 4, nie pokazane) dały wyniki zasadniczo identyczne z M-III CON. (być). Histologia uszkodzeń powstałych w wyniku transduktantów M-III. Nowotwory obu genotypów były domieszkami trzech typów morfologicznych. (b) guz M-III DNR pokazujący wszystkie trzy morfologie (Cr, struktury kojąkowe, Cl, komórki jasne, At, obszar atypii); (c) gruczołów obwodowych w guzie M-III CON; (d) oczyścić obszar komórek w guzie M-III CON; (e) obszar atypii od guza DNR M-III. Powiększenie: × 100 (b) i × 400 (c. E). (f) klasy Atypia i mitozy w guzach M-III. Przekroje histologiczne były klasyfikowane od 0 do 4 niezależnie dla zakresu atypii i częstotliwości mitozy, jak wyszczególniono w Metodach. (g) Proliferacja i wskaźniki apoptozy w guzach M-III. Proliferację komórek guza określono ilościowo przez zliczenie wyznakowanych BrdU jąder na skrawkach histologicznych, a komórki apoptotyczne oznaczono ilościowo za pomocą testu TUNEL. Wyniki są średnie. SD dla co najmniej pięciu guzów każdego genotypu [hasła pokrewne: body space tychy, ile kalorii ma mozzarella, tabletki na nerwy bez recepty ] [więcej w: body space tychy, space tychy, medycyna pracy nysa ]