Kwas dimetyloguanidyno-walerianowy jest markerem tłuszczu wątrobowego i przewiduje cukrzycę ad

Ten zasób umożliwia badaczom powiązanie ich własnych metabolitów będących przedmiotem zainteresowania w bogato fenotypowej kohorcie i wykorzystanie dostępnych danych genetycznych do informowania o identyfikacji nieznanych pików. najtrudniejszy krok w nie ukierunkowanej metabolomice. Wyniki m / z 202.1185 koreluje się z tłuszczem wątrobowym zdefiniowanym przez CT. Zastosowaliśmy nieukierunkowane wykrywanie LC-MS (patrz Metody) do kohorty 1066 uczestników III generacji FHS (Tabela 1). Spośród nich 470 uczestników przeszło badanie TK w ramach kompleksowej oceny depozycji tłuszczy, w tym tłuszczu wątrobowego, które określono ilościowo przy użyciu stosunku wątroba-fantom (LPR) (22). Read more „Kwas dimetyloguanidyno-walerianowy jest markerem tłuszczu wątrobowego i przewiduje cukrzycę ad”

Badanie długich niekodujących RNA przy użyciu modeli zwierzęcych

Liczba długo niekodujących RNA (lncRNA) gwałtownie wzrosła; jednak nasze zrozumienie ich funkcji pozostaje ograniczone. Chociaż hodowane komórki ułatwiły badanie funkcji lncRNA na poziomie molekularnym, zastosowanie modeli zwierzęcych zapewnia bogaty kontekst do badania fenotypowego wpływu tych cząsteczek. Obiecujące wstępne badania z wykorzystaniem modeli zwierzęcych wykazały, że lncRNA wpływają na różnorodną liczbę fenotypów, od subtelnych dysmorfofobii do żywotności. Tutaj podkreślamy różnorodność modeli zwierzęcych i ich wyjątkowe zalety, omawiamy zastosowanie modeli zwierzęcych do profilowania ekspresji lncRNA, oceniamy strategie eksperymentalne do manipulowania funkcją lncRNA in vivo i przeglądamy fenotypy przypisywane lncRNA. Pomimo ograniczonej liczby badań wykorzystujących modele zwierzęce, lncRNA są już rozpoznawane jako godna uwagi klasa cząsteczek o ważnych implikacjach dla zdrowia i choroby. Read more „Badanie długich niekodujących RNA przy użyciu modeli zwierzęcych”

Badanie długich niekodujących RNA przy użyciu modeli zwierzęcych ad 8

Możliwy fenotyp może obejmować duże spektrum składające się z efektów biochemicznych, anatomicznych, fizjologicznych lub behawioralnych, a zatem brak zgłoszonego fenotypu może po prostu reprezentować ograniczony wybór nienaruszonych fenotypów. Efekty kompensacyjne mogą dodatkowo łagodzić pojawianie się fenotypu. Alternatywne podejścia. Nadekspresja lncRNA jest alternatywną strategią oceny jej efektów fenotypowych. To podejście zostało z powodzeniem zastosowane w modelach zwierzęcych przy użyciu genów kodujących białka do badania zaburzeń neuropsychiatrycznych, które mogą wynikać z braku utrzymania homeostazy po uzyskaniu lub utracie ekspresji genów (117). Read more „Badanie długich niekodujących RNA przy użyciu modeli zwierzęcych ad 8”

Tłumaczenie represji HIF2 ekspresja u myszy z Chuvash polycythemia odwraca czerwienicę ad 8

Ilość powstałej mieszaniny reakcyjnej wynosząca 20 ul została załadowana do 10% żelu akrylamid / TBE, który pracował przy 200 V przez 2,15 godziny, a żel utrwalono, wysuszono i wystawiono na autoradiografię. Ocenę ilościową przeprowadzono przy użyciu programu ImageQuant do analizy Western blot i przeciwciał w systemie Macintosh (GE Healthcare). Lizaty tkankowe przygotowano w beztlenowej komorze w pozbawionym tlenu buforze do lizy, zawierającym 50 mM Tris-HCl (pH 7,5), 150 mM NaCl, 0,1% SDS, 0,5% dezoksycholanu sodu, 1% Triton X-100, mM PMSF, i Kompletna mieszanina inhibitorów proteaz bez EDTA. Analizę białka z beztlenowymi lizatami przeprowadzono zgodnie z wcześniejszym opisem (53). Lizaty dodano do buforów do próbek w beztlenowej komorze do eksperymentów Western blot. Read more „Tłumaczenie represji HIF2 ekspresja u myszy z Chuvash polycythemia odwraca czerwienicę ad 8”

Selektywna aktywacja i znaczenie funkcjonalne p38 aktywowana mitogenem kinaza białkowa w neutrofilach stymulowanych lipopolisacharydami ad

Jako pojedynczy bodziec, LPS jest nieskuteczny w wywoływaniu chemokinezy, chemotaksji lub uwalniania anionu ponadtlenkowego lub enzymów ziarnistych. Reakcje funkcjonalne na LPS zależne od syntezy białek de novo polegają głównie na uwalnianiu cytokin (16). Postawiliśmy hipotezę, że neutrofile wykorzystują kaskadę p38 MAPk do łączenia prozapalnych bodźców z szeregiem odpowiedzi funkcjonalnych. Dodatkowa swoistość może wystąpić poprzez selektywną aktywację członków rodziny MKK i izoform p38 MAPk. Zbadaliśmy bezpośrednie zdarzenia sygnalizacyjne w górę strumienia, prowadzące do aktywacji p38 MAPk, względnej aktywacji czterech izoform p38 MAPk oraz konsekwencji funkcjonalnych aktywacji p38 MAPk po stymulacji LPS. Read more „Selektywna aktywacja i znaczenie funkcjonalne p38 aktywowana mitogenem kinaza białkowa w neutrofilach stymulowanych lipopolisacharydami ad”

Regulacja masy kostnej za pomocą sygnalizacji Wnt

Białka Wnt to rodzina wydzielanych białek, które regulują wiele aspektów wzrostu, różnicowania, funkcji i śmierci komórek. Poczyniono znaczne postępy w naszym zrozumieniu powiązań molekularnych między sygnalizacją Wnt a rozwojem kości i przebudową, ponieważ początkowe doniesienia wskazują, że mutacje receptora 5 receptora lipoprotein o niskiej gęstości białka Wnt (LRP5) są powiązane przyczynowo ze zmianami w masie kości człowieka . Spośród szlaków aktywowanych przez Wnt, sygnalizuje ona szlak kanoniczny (tj. Wnt / a-katenina), który zwiększa masę kości poprzez szereg mechanizmów, w tym odnowę komórek macierzystych, stymulację replikacji preosteoblastów, indukcję osteoblastogenezy i hamowanie osteoblast i apoptoza osteocytów. Ta droga stanowi kuszący cel opracowywania leków do walki z chorobami szkieletowymi, ponieważ sygnalizacja Wnt / a-katenina składa się z serii interakcji molekularnych, które oferują potencjalne miejsca do interwencji farmakologicznej. Read more „Regulacja masy kostnej za pomocą sygnalizacji Wnt”

Toksyczne sole żółciowe indukują apoptozę hepatocytów gryzoni poprzez bezpośrednią aktywację Fas

Cholestatyczne uszkodzenie wątroby wydaje się wynikać z indukcji apoptozy hepatocytów toksycznymi solami kwasów żółciowych, takimi jak glikocenodeoksycholan (GCDC). Poprzednie badania z tego laboratorium wskazują, że katepsyna B jest dalszą proteazą efektorową podczas procesu apoptotycznego hepatocytów. Ponieważ kaspazy mogą inicjować apoptozę, niniejsze badania zostały podjęte w celu określenia roli kaspaz w aktywacji katepsyny B. Immunoblotowanie komórek wątrobiaka McNtcp.24 traktowanych GCDC wykazało rozszczepienie polimerazy poli (ADP-rybozy) i laminatu B1 na fragmenty wskazujące na aktywację efektorowych kaspaz. Transfekcja CrmA, inhibitorem kaspazy 8, zapobiegła indukowanej przez GCDC aktywacji katepsyny B i apoptozie. Read more „Toksyczne sole żółciowe indukują apoptozę hepatocytów gryzoni poprzez bezpośrednią aktywację Fas”

Toksyczne sole żółciowe indukują apoptozę hepatocytów gryzoni poprzez bezpośrednią aktywację Fas ad 8

Ponieważ katepsyna B występuje przeważnie w kwaśnych pęcherzykach, bezpośrednia droga może obejmować internalizację kompleksu Fas receptor / FADD / kaspaza 8 i fuzję z pęcherzykami zawierającymi katepsynę B3. Monney i współpracownicy (40) uprzednio zasugerowali tę ścieżkę dla sygnalizacji receptora śmierci w celu wyjaśnienia ich obserwacji, że alkalizowanie kwaśnych pęcherzyków zmniejsza apoptozę. Internalizacja kompleksu sygnałowego receptora Fas może być ułatwiona przez aktywację receptora Fas w sposób niezależny od ligandu, jak zaobserwowano w naszych badaniach. Internalizacja DISC i fuzja z kwaśnymi pęcherzykami może również wyjaśniać, w jaki sposób wytwarzanie ceramidów przez kwaśną sfingomielinazę (również obecną w pęcherzykach) występuje w procesie apoptozy (40). Alternatywnie, kaspaza 8 może modulować funkcję pęcherzykową poprzez pośrednią, obecnie niezidentyfikowaną, cytosolową ścieżkę sygnalizacyjną. Read more „Toksyczne sole żółciowe indukują apoptozę hepatocytów gryzoni poprzez bezpośrednią aktywację Fas ad 8”

Ceramidy jako modulatory metabolizmu komórkowego i całego ciała ad 7

Jednak ostatnie badania przeprowadzone in vivo przy użyciu inhibitorów syntezy glukozyloceramidów nowej generacji, które nie indukują ceramidu, sugerują inny wniosek. Dwa różne inhibitory syntazy glukozyloceramidowej (GCS), gdy są podawane gryzoniom, mają szereg korzystnych wpływów na metabolizm. Aerts i in. odkryli, że inhibitor GCS poprawiał wątrobową wrażliwość na insulinę (112), a przedłużone leczenie zmniejszało stan zapalny wątroby z otyłością wywołaną dietą (113); podobną poprawę zaobserwowano w przypadku drugiego inhibitora GCS (114). Związki te wydają się odwracać wiele powikłań związanych z otyłością, w tym cukrzycą (112), zapaleniem tkanki tłuszczowej (113), stłuszczeniem wątroby (115) i miażdżycą tętnic (114), chociaż doniesienia o tym ostatnim są kontrowersyjne (116). Read more „Ceramidy jako modulatory metabolizmu komórkowego i całego ciała ad 7”

Niehamujący mutant domeny rusztowania jaskini-1 wzmacnia syntezę NO pochodzącą z eNOS i rozszerzenie naczyń u myszy

Nieprawidłowa regulacja eNOS i związanego z nim uwalniania NO są bezpośrednio związane z różnymi chorobami naczyniowymi. Caveolin-1 (Cav-1), główne białko otoczki kaweoli, ulega silnej ekspresji w komórkach śródbłonka. Jego domena rusztowania służy jako endogenny negatywny regulator funkcji eNOS. Analiza struktury i funkcji Cav-1 wykazała, że fenyloalanina 92 (F92) jest krytyczna dla hamujących działań Cav-1 wobec eNOS. Tutaj pokazujemy, że F92AA-Cav-1 i zmutowany przepuszczalny dla komórki peptyd domeny rusztowania zwany Cavnoxin może zwiększać podstawowe uwalnianie NO w komórkach wyrażających eNOS. Read more „Niehamujący mutant domeny rusztowania jaskini-1 wzmacnia syntezę NO pochodzącą z eNOS i rozszerzenie naczyń u myszy”