W stronę terapii transkrypcyjnych serca upośledzającego: ekrany chemiczne służące do modulowania genów ad 6

W związku z tym może być możliwe selektywne tłumienie kalcyneuryny w sercu poprzez wzmocnienie ekspresji MCIP lub jej połączenia z kalcyneuryną. Ekspresja MCIP1 jest aktywowana przez kalcyneurynę poprzez serię miejsc wiązania NFAT w promotorze genu MCIP1, który zapewnia zależną od kalcyneuryny pętlę ujemnego sprzężenia zwrotnego, dzięki której serce może ograniczyć potencjalnie szkodliwą sygnalizację kalcyneuryną (Figura 5) (57). Zgodnie z poglądem, że MCIP1 działa jako endogenny supresor kalcyneuryny, myszy pozbawione MCIP1 są nadwrażliwe na sygnalizację kalcyneuryną i szybko rozwijają się śmiertelny przerost serca w odpowiedzi na aktywację kalcyneuryny (Figura 6) (58). Odwrotnie, nadekspresja MCIP w sercu chroni przed różnymi sygnałami stresu i blokuje hipertrofię (ryc. 6) (59, 60). Read more „W stronę terapii transkrypcyjnych serca upośledzającego: ekrany chemiczne służące do modulowania genów ad 6”

Kwas dimetyloguanidyno-walerianowy jest markerem tłuszczu wątrobowego i przewiduje cukrzycę ad 5

Wstępne badania eksperymentalne w naszym laboratorium wykazały zwiększoną ekspresję AGXT2 w wątrobach myszy karmionych dietą wysokotłuszczową (HFD), z proporcjonalnym wzrostem poziomów DMGV w krążeniu (Suplementalna Figura 5). Nasz model pracy polega na tym, że podczas rozwoju NAFLD obniżona aktywność enzymatyczna DDAH1 (34. 36) i obniżone poziomy BAIBA w chorobie kardiometabolicznej (32) prowadzą do zwiększenia stężenia ADMA, które wiąże AGXT2 bardziej swobodnie (z powodu zmniejszonego poziomu BAIBA, główny substrat AGXT2), a tym samym prowadzi do zwiększonej konwersji do DMGV przez AGXT2 (patrz Suplementowa Figura 6). Ponadto nasze badania ekspresji AGXT2 na mysią wątrobę sugerują, że w NALFD ekspresja AGXT2 jest zwiększona i że, co sugeruje, występuje większa aktywność enzymatyczna powodująca konwersję ADMA do DMGV. Przyszłe badania muszą określać, czy sam DMGV nadaje efekty funkcjonalne w systemach modelowych. Read more „Kwas dimetyloguanidyno-walerianowy jest markerem tłuszczu wątrobowego i przewiduje cukrzycę ad 5”

Badanie długich niekodujących RNA przy użyciu modeli zwierzęcych czesc 4

Ta cecha sprawia, że modele zwierzęce dobrze nadają się do badania lncRNA, ponieważ ekspresja lncRNA jest bardziej specyficzna względem tkanki i komórki niż ekspresja genu kodującego białko (5, 10, 64). W porównaniu z komórkami hodowanymi materiał pochodzący od zwierząt jest generalnie mniej obfity i bardziej czasochłonny do wygenerowania. Niemniej jednak, modele zwierzęce zapewniają bezpośredni, in vivo dowód endogennej ekspresji lncRNA i dramatycznie zawężają odpowiednią przestrzeń poszukiwań podczas badania fenotypów. Nowoczesne techniki dostępne dla badań genomicznych, takie jak RNA-seq, zapewniają bezstronne, wysokoprzepustowe podejście do badania endogennej ekspresji lncRNA oraz odkrywania i składania nowych lncRNA de novo (64). Ekspresja lncRNA w obrębie rażąco rozciętej tkanki może ujawnić swoistość tkanki, chociaż lncRNA wyrażane tylko w niewielkiej części komórek mogą być niewykrywalne. Read more „Badanie długich niekodujących RNA przy użyciu modeli zwierzęcych czesc 4”

Tłumaczenie represji HIF2 ekspresja u myszy z Chuvash polycythemia odwraca czerwienicę czesc 4

Znaleźliśmy Hif2. poziomy białka były zwiększone w lizatach myszy nerki VhlR200W, ale znacznie zmniejszone, gdy zmutowane myszy karmiono dietą z uzupełnieniem Tempol (Figura 3, B i C). Zmierzyliśmy poziomy mRNA innych celów HIF. Chociaż Hickey i in. (14) stwierdzili niewielką, ale znacznie wyższą ekspresję genu Glut1 w lizatach VhlR200W nerki, poziomy mRNA Glut pozostały niezmienione w nerkach naszych myszy VhlR200W, ani terapia Tempol nie zmieniała ekspresji Glut1 (Suplementowa Figura 3A). Read more „Tłumaczenie represji HIF2 ekspresja u myszy z Chuvash polycythemia odwraca czerwienicę czesc 4”

Ratowanie odporności przeciwdrobnoustrojowej za pośrednictwem limfocytów T CD8 z nieswoistym bodźcem zapalnym cd

Siedemdziesiąt dwie godziny po zakażeniu usunięto śledziony i wątroby, a liczbę żywych bakterii w tych narządach oceniano przez homogenizację tkanek za pomocą siatki drucianej w PBS zawierającym 0,05% Triton X-100. Następnie podwielokrotności umieszczono na płytkach agarowych do infuzji mózgu i serca (Life Technologies Inc.) i CFU policzono po 24. 48 godzinach inkubacji. Podawanie mAb in vivo. MAb anty-CD40 oczyszczono z hybrydoma FGK-45, a 100 .g wstrzyknięto dootrzewnowo myszom biorcom we wskazanych punktach czasowych. Read more „Ratowanie odporności przeciwdrobnoustrojowej za pośrednictwem limfocytów T CD8 z nieswoistym bodźcem zapalnym cd”

Selektywna aktywacja i znaczenie funkcjonalne p38 aktywowana mitogenem kinaza białkowa w neutrofilach stymulowanych lipopolisacharydami ad 5

Bloty b poddano reprotekcji przeciwciałem przeciw fosfotyrozynie zdolnym do reakcji z fosforylowanymi resztami tyrozyny zarówno z p38. i p38. MAPK. (d) Aktywacja p38. i p38. Read more „Selektywna aktywacja i znaczenie funkcjonalne p38 aktywowana mitogenem kinaza białkowa w neutrofilach stymulowanych lipopolisacharydami ad 5”

Regulacja masy kostnej za pomocą sygnalizacji Wnt ad 5

Niedawny raport wskazał, że regulator transkrypcji, koaktywator transkrypcji z domeną PDZ (TAZ), pośredniczy w działaniu BMP-2 na losy mezenchymalnej komórki poprzez hamowanie PPAR-a. aktywność podczas stymulacji Runx2; jednakże nie doniesiono o potencjalnej roli, w której pośredniczy TAZ sygnalizacja Wnt / a-katenina (58). Apoptoza. Indukcja przyrostu kości w modelach myszy ze zwiększoną sygnalizacją Wnt wynika po części ze zmniejszonej apoptozy osteoblastów i osteocytów (14, 17, 59). Sygnalizacja Wnt hamuje apoptozę w odpowiedzi na szeroką gamę zniewag komórkowych, w tym czynników chemioterapeutycznych i deprywacji w surowicy (60. Read more „Regulacja masy kostnej za pomocą sygnalizacji Wnt ad 5”

Toksyczne sole żółciowe indukują apoptozę hepatocytów gryzoni poprzez bezpośrednią aktywację Fas czesc 4

Dane te, wykorzystujące komórki McNtcp.24, potwierdzają i rozszerzają nasze poprzednie obserwacje, że aktywność katepsyny B zwiększa się i przyczynia się do apoptozy za pośrednictwem żółci w pierwotnych hepatocytach szczura (8). Figura Aktywność askatryny B wzrasta podczas indukowanej przez GCDC apoptozy komórek McNtcp.24, a inhibitory katepsyny B zmniejszają apoptozę. Komórki inkubowano w samej pożywce lub z 50. M GCDC pod nieobecność lub w obecności 100. M FA-fmk (w całym doświadczeniu) lub 0,1. Read more „Toksyczne sole żółciowe indukują apoptozę hepatocytów gryzoni poprzez bezpośrednią aktywację Fas czesc 4”

Ceramidy jako modulatory metabolizmu komórkowego i całego ciała cd

Ceramid może być również wytwarzany przez katabolizm innych złożonych sfingolipidów, choćby pośrednio. Poprzez serię zdarzeń określanych jako recykling sfingolipidowy lub szlak odzyskowy, sfingolipidy wyższego rzędu (sfingomielina i glikosfingolipidy) są rozkładane w kwasowych przedziałach komórkowych przez rezydujące enzymy (odpowiednio kwaśną SMase i kwasową a-glukozydazę 1) w celu wytworzenia ceramidu (40 > 42), który sam ulega degradacji do sfingozyny i FFAs, które są zdolne do dostania się do cytozolu (43). Po wprowadzeniu do cytosolu sfingozyna jest przekształcana z powrotem w ceramid za pośrednictwem ceramidazy. Chociaż jest to mniej znane, droga uszkodzona może stanowić ponad połowę puli sfingolipidów w komórce (44). Względne znaczenie tego szlaku w przypadku nagromadzenia ceramidów wywołanych otyłością pozostaje nieznane. Read more „Ceramidy jako modulatory metabolizmu komórkowego i całego ciała cd”

Limfocyty T regulatorowe CD4 + CD25 + hamują odrzucanie alloprzeszczepu, w którym pośredniczą limfocyty T pamięci CD8 + za pośrednictwem mechanizmu zależnego od CD30 cd

Komórki następnie utrwalono w 70% etanolu, a następnie 1% paraformaldehydzie i inkubowano z 50 U / ml DNazy I (Sigma-Aldrich). Komórki ostatecznie wybarwiono anty-BrdU . FITC (BD Biosciences) i analizowano za pomocą cytometrii przepływowej. W celu wykrycia apoptozy komórki infiltrujące przeszczep umieszczono w 2% paraformaldehydzie, permeabilizowano 0,1% roztworem Triton X-100 i znakowano znakowanym fluoresceiną dUTP metodą TUNEL zgodnie z instrukcjami producenta (Roche Diagnostics Corp., Indianapolis , Indiana, USA). Analiza proliferacji komórek T pamięci i apoptozy in vitro. Read more „Limfocyty T regulatorowe CD4 + CD25 + hamują odrzucanie alloprzeszczepu, w którym pośredniczą limfocyty T pamięci CD8 + za pośrednictwem mechanizmu zależnego od CD30 cd”