W stronę terapii transkrypcyjnych serca upośledzającego: ekrany chemiczne służące do modulowania genów ad 6

W związku z tym może być możliwe selektywne tłumienie kalcyneuryny w sercu poprzez wzmocnienie ekspresji MCIP lub jej połączenia z kalcyneuryną. Ekspresja MCIP1 jest aktywowana przez kalcyneurynę poprzez serię miejsc wiązania NFAT w promotorze genu MCIP1, który zapewnia zależną od kalcyneuryny pętlę ujemnego sprzężenia zwrotnego, dzięki której serce może ograniczyć potencjalnie szkodliwą sygnalizację kalcyneuryną (Figura 5) (57). Zgodnie z poglądem, że MCIP1 działa jako endogenny supresor kalcyneuryny, myszy pozbawione MCIP1 są nadwrażliwe na sygnalizację kalcyneuryną i szybko rozwijają się śmiertelny przerost serca w odpowiedzi na aktywację kalcyneuryny (Figura 6) (58). Odwrotnie, nadekspresja MCIP w sercu chroni przed różnymi sygnałami stresu i blokuje hipertrofię (ryc. 6) (59, 60). Wykazano również, że nadekspresja MCIP podtrzymuje czynność serca i zwiększa przeżycie po zawale mięśnia sercowego u myszy (61). Co istotne, blokowanie hipertrofii przez nadekspresję MCIP nie powoduje dekompensacji serca, co potwierdza pogląd, że strategie zapobiegania patologicznemu przerostowi niekoniecznie będą miały skutek przeciwny do zamierzonego (55, 59, 60). MCIP odgrywa również rolę permisywną w aktywacji kalcyneuryną, której podstawa nie jest w pełni zrozumiała (58). Jednakże aktywność hamująca MCIP w stosunku do kalcyneuryny jest dominująca w warunkach nadekspresji MCIP. Figura 6Modulacja sygnalizacji kalcyneuryny sercowej za pomocą ekspresji MCIP. Górny zestaw paneli pokazuje wpływ sygnalizacji kalcyneuryny u myszy z nokautem MCIP1. W przypadku braku MCIP serce jest uwrażliwione na sygnalizację kalcyneuryną i gwałtownie przechodzi przerażający zgon. Ze względu na zwiększoną wrażliwość myszy z nokautem MCIP1 na kalcyneurynę, tylko nieokreślony transgen kalcyneuryny może ulegać ekspresji w nieobecności MCIP1. Silniejszy transgen kalcyneuryny, stosowany w niższych panelach, powoduje niewydolność serca i śmierć w ciągu pierwszych kilku dni po urodzeniu. Dolny zestaw paneli pokazuje wpływ sygnalizacji kalcyneuryny u myszy, które wykazują nadekspresję MCIP1 w sercu. Nadekspresja MCIP1 zapobiega patologicznemu przerostowi. Zaadaptowane za pozwoleniem Proceedings of the National Academy of Sciences w Stanach Zjednoczonych Ameryki (58, 59). Chemiczny ekran dla modulatorów osi kalcyneuryny / NFAT W oparciu o pozorne kardioprotekcyjne funkcje MCIP1, zaprojektowano wysokowydajny ekran dla małych aktywatorów molekularnych o ekspresji MCIP1 w miocytach sercowych (27). Zasadniczo takie aktywatory mogą indukować ekspresję MCIP1 poprzez stymulację szlaku sygnałowego kalcyneuryna / NFAT, w którym to przypadku będą prawdopodobnie prohypertroficzne lub mogą działać przez inne mechanizmy. W badaniu wykorzystującym regulatorowe sekwencje DNA z genu MCIP1 połączonego z reporterem lucyferazy zidentyfikowano kilka nowych małych cząsteczek zdolnych do indukowania ekspresji lucyferazy (27). Jeden taki aktywator, pirydynowy aktywator przerostu miocytów (PAMH), dramatycznie stymulował ekspresję MCIP1. Analiza struktury PAMH ujawniła wbudowany farmakofor przypominający serotoninę (5-hydroksytryptaminę [5-HT]) (Figura 7). Rzeczywiście, antagoniści receptora 5-HT znosili aktywność PAMH na kardiomiocytach, a bezpośrednie testy wiązania liganda pokazały, że PAMH wiąże receptor 5-HT2B z powinowactwem około 60 nM (27). Ryc. 7 Struktury serotoniny, PAMH i A-PAMH. Dzięki analizie wpływu szeregu małych cząsteczkowych inhibitorów na aktywność PAMH stwierdzono, że PAMH indukuje ekspresję MCIP1 przez aktywację kalcyneuryny, co prowadzi do nuklearnego importu NFAT i przez promowanie zależnego od fosforylacji eksportu jądrowego HDAC klasy II. Tak więc, chociaż PAMH silnie reguluje ekspresję MCIP, to czyni to poprzez mechanizmy, które przewidują zaostrzenie patologicznej przebudowy serca. Rzeczywiście stwierdzono, że PAMH dramatycznie stymuluje przerost hodowanych miocytów. Biorąc pod uwagę to niedociągnięcie, opracowano dodatkowe ekrany w celu zidentyfikowania małych cząsteczek, które podnoszą poziomy białek MCIP serca poprzez mechanizmy niezależne od kalcyneuryny. Chociaż PAMH raczej nie będzie postępować jako kandydat do rozwoju niewydolności serca, zmienił paradygmat sygnalizacji sercowej kalcyneuryny i odkrył nowe możliwości manipulowania sygnalizacją wapnia w sercu. Ponieważ PAMH jest w stanie naśladować 5-HT, przebadaliśmy strukturalnie pokrewne związki, aby znaleźć taki, który może również modulować sygnalizację kalcyneuryny przez receptor 5-HT2B i odkrył inną nową 4-aminopirydynę, A-PAMH, która antagonizuje aktywność PAMH ( 27). Intrygujące, A-PAMH blokuje również przerostowe efekty PE, który działa poprzez receptor a-adrenergiczny
[patrz też: żel pod prysznic bez sls, apteczka pierwszej pomocy nie powinna zawierać, lekarz medycyny pracy nysa ]
[więcej w: kalkulator zapotrzebowania kalorycznego na mase, odkwaszanie organizmu przepisy, apteczka pierwszej pomocy nie powinna zawierać ]