Toksyczne sole żółciowe indukują apoptozę hepatocytów gryzoni poprzez bezpośrednią aktywację Fas ad 8

Ponieważ katepsyna B występuje przeważnie w kwaśnych pęcherzykach, bezpośrednia droga może obejmować internalizację kompleksu Fas receptor / FADD / kaspaza 8 i fuzję z pęcherzykami zawierającymi katepsynę B3. Monney i współpracownicy (40) uprzednio zasugerowali tę ścieżkę dla sygnalizacji receptora śmierci w celu wyjaśnienia ich obserwacji, że alkalizowanie kwaśnych pęcherzyków zmniejsza apoptozę. Internalizacja kompleksu sygnałowego receptora Fas może być ułatwiona przez aktywację receptora Fas w sposób niezależny od ligandu, jak zaobserwowano w naszych badaniach. Internalizacja DISC i fuzja z kwaśnymi pęcherzykami może również wyjaśniać, w jaki sposób wytwarzanie ceramidów przez kwaśną sfingomielinazę (również obecną w pęcherzykach) występuje w procesie apoptozy (40). Alternatywnie, kaspaza 8 może modulować funkcję pęcherzykową poprzez pośrednią, obecnie niezidentyfikowaną, cytosolową ścieżkę sygnalizacyjną. Chociaż potrzebne są dalsze dane, aby wyjaśnić potencjalne interakcje między kaspazą 8 a kwasowymi pęcherzykami, opublikowane dane, wraz z obecnymi obserwacjami na temat katepsyny B, sugerują, że kwaśne pęcherzyki i ich składniki mogą przyczyniać się do realizacji programu apoptozy. Trzy dodatkowe obserwacje sugerują, że indukowana solą żółciowa aktywacja kaspazy 8 obejmuje receptor Fas i białko adaptorowe FADD. Po pierwsze, hepatocyty myszy lpr z niedoborem Fas są oporne na apoptozę indukowaną przez GCDC. Po drugie, nadekspresja białka MG159 zawierającego domenę efektorową, zawierającą domenę A, która kompetycyjnie hamuje wiązanie kaspazy 8 z FADD, osłabia apoptozę wywołaną solą żółciową. Po trzecie, nadekspresja DN-FADD hamuje apoptozę za pośrednictwem GCDC. Pomimo danych sugerujących Fas i FADD w apoptozie indukowanej przez GCDC, ekspresja FasL nie mogła być wykryta przez PCR nawet w komórkach traktowanych GCDC. Indukcję śmierci komórkowej zależnej od receptora Fas w nieobecności FasL zaobserwowano wcześniej w systemach nadekspresji receptora Fas (41) i komórkach traktowanych UV (30, 31). Stosując podejście sieciujące opisane w tym ostatnim badaniu, wykazaliśmy indukowaną przez GCDC fasolizację Fas, pomimo widocznej nieobecności FasL. Badania z GFP. DN FADD podobnie wykazują agregację Fas w komórkach potraktowanych toksycznymi solami żółciowymi. Potencjalne mechanizmy, dzięki którym toksyczne sole żółciowe bezpośrednio wywołują te interakcje, są nieznane, ale prawdopodobnie związane są z hydrofobowością soli żółciowych i ich zdolnością do interkalacji w błonach lub wiązania z białkami (42). Lepsze zrozumienie dokładnych mechanizmów, dzięki którym żółć aktywuje system Fas / FADD, może dostarczyć wglądu w dynamikę receptora Fas, a także w potencjalne strategie terapeutyczne w cholestatycznej chorobie wątroby. Dane te oczywiście nie wykluczają możliwości, że sole żółciowe mogą również sprzyjać oligomeryzacji innych receptorów zawierających domenę śmierci, takich jak receptor TRAIL, które mogą również przyczyniać się do apoptozy za pośrednictwem dróg żółciowych in vivo. Podsumowując, dane z bieżącego badania sugerują, że toksyczne sole żółciowe powodują śmierć komórki, częściowo przez aktywację kaskady proteazy. Proksymalna sygnalizacyjna kaspaza proteazy 8 wydaje się być aktywowana przez toksyczne sole kwasów żółciowych w sposób zależny od receptora Fas, ale niezależny od FasL. Po aktywacji kaspazy 8 wzrasta również aktywność katepsyny B. Hamowanie którejkolwiek z proteaz osłabia apoptozę in vitro, co sugeruje, że obie odgrywają kluczową rolę w apoptozie indukowanej przez sól żółciową. Implikacje tych wyników dla potencjalnej terapii cholestatycznej choroby wątroby są obecnie badane. Podziękowania Pomoc sekretarska Sary Erickson i Deb Strauss została przyjęta z wdzięcznością. Dziękujemy Haraldowi Wajantowi za hojne udostępnienie pcDNA3-GFP-aFADD oraz Jeffery Cohen i Johna Bertina (Narodowy Instytut Alergii i Chorób Zakaźnych, Bethesda, Maryland, USA) za wyposażenie pCl-MC159. Jesteśmy również wdzięczni Anu Srinivasanowi (IDUN Pharmaceuticals, La Jolla, Kalifornia, USA) za dostarczenie anty-surowicy anty-kaspazy 8. Praca ta była wspierana przez granty od National Institutes of Health (DK-41876 do GJ Gores i CA-69008 do SH Kaufmann), Gainey Foundation (do GJ Gores) oraz do Fundacji Mayo.
[przypisy: infekcja dróg moczowych objawy, ośrodki terapii uzależnień, kapsuła tychy ]
[hasła pokrewne: żel pod prysznic bez sls, stosowanie tabletek antykoncepcyjnych, solarium tychy ]