Selektywna aktywacja i znaczenie funkcjonalne p38 aktywowana mitogenem kinaza białkowa w neutrofilach stymulowanych lipopolisacharydami

Aktywacja leukocytów przez bodźce prozapalne selektywnie inicjuje wewnątrzkomórkowe przekazywanie sygnału przez sekwencyjną fosforylację kinaz. Stymulacja lipopolisacharydów (LPS) ludzkich neutrofilów powoduje aktywację kinazy białkowej aktywowanej mitogenem p38 (MAPk); jednakże górny aktywator (-y) p38 MAPk jest nieznany, a konsekwencje aktywacji p38-MAPk pozostają w dużej mierze niezdefiniowane. Zbadaliśmy kinazę MAPk (MKK), która aktywuje p38 MAPk w odpowiedzi na LPS, izoformę p38 MAPk, które są aktywowane jako część tego szlaku, i odpowiedzi funkcjonalne, na które ma wpływ aktywacja p38 MAPk. Chociaż MKK3, MKK4 i MKK6 wszystkie aktywowały p38 MAPk w modelach eksperymentalnych, tylko MKK3 okazało się aktywować rekombinowany p38 MAPk w neutrofilach traktowanych LPS. Z zbadanych izoform p38 MAPk, tylko p38. i p38. wykryto w neutrofilach. Stymulacja LPS selektywnie aktywowała p38 .. Specyficzne inhibitory p38. MAPk blokował adhezję indukowaną przez LPS, aktywację jądrowo-kappa B (NF-kB) i syntezę czynnika martwicy nowotworów-. (TNF-a). Hamowanie p38. MAPk powodował przejściowe zmniejszenie TNF-a akumulacja mRNA, ale długotrwała utrata TNF-a synteza. Te odkrycia wspierają szlak, w którym stymulacja LPS neutrofili powoduje aktywację MKK3, co z kolei aktywuje p38. MAPk, ostatecznie regulując adhezję, aktywację NF-kB, zwiększoną ekspresję genu TNF-a i regulację TNF-a synteza. Wstęp Stymulacja ludzkich neutrofili lipopolisacharydem (LPS) wywołuje reakcje funkcjonalne, które są kluczowe dla patogenezy szeregu chorób ludzkich. Jednakże, wewnątrzkomórkowe ścieżki sygnałowe stosowane przez neutrofile w odpowiedzi na bodźce prozapalne zaczęły być dopiero poznawane. Niedawne wyznaczenie nadrodziny kinazy białkowej aktywowanej mitogenem (MAPk) zapewnia strukturę zrębową, w której można zrozumieć odpowiedź neutrofili na LPS. MAPKI są wysoce konserwatywnymi kinazami sygnałowymi, które działają regulująco na wzrost komórek, różnicowanie i odpowiedzi na stres (1). W komórkach ssaczych istnieją co najmniej trzy odrębne rodziny MAP: p53 / 44 pozakomórkowe kinazy regulatorowej (ERK), kinazy końcowe C-Jun NH2 (JNK) i p38 MAPk (2. 4). Nasza grupa i inni (5, 6) podali, że p38 MAPk jest aktywowany w neutrofilach po związaniu LPS z CD14. Przeciwnie, ani p42 / 44 (ERK), ani MAPK, ani JNK nie są aktywowane przez stymulację LPS neutrofili w tych warunkach (5. 7). Aktywacja MAPk jest ostatnim krokiem w trzyczęściowej wewnątrzkomórkowej kaskadzie transdukcji sygnału, w której MAP / Kinaza kinazy ERK (MEKK) lub Raf aktywuje (poprzez fosforylację) kinazę MAP / ERK (MEK lub MKK), która z kolei fosforyluje specyficzną resztę tyrozyny i treoniny na MAPk (1). Co najmniej trzech członków nadrodziny MKK może aktywować p38 MAPk. Po nadekspresji w liniach komórkowych MKK3 (również określany jako MEK3), MKK4 (JNKK1) i MKK6 (MEK6) mogą fosforylować i aktywować p38 MAPk (8, 9). Cztery różne izoformy p38 MAPk zostały zidentyfikowane w komórkach ssaków. Pierwotnie opisany ludzki homolog kinazy HOG1 Saccharomyces cerevisiae i myszy p38 MAPk (2) jest teraz określany jako p38 .. Następnie opisane izoformy obejmują p38. z 74% identycznością aminokwasową do p38 p, p38. (60% identyczności z p38.) I p38. (57% identyczności z p38.) (10, 11). Wszystkie te izoformy mają wspólny motyw TGY w poddomenie kinazy VIII, gdzie do aktywacji wymagana jest fosforylacja specyficznej treoniny i reszt tyrozynowych. Po aktywacji p38 MAPK wydaje się zdolny do dalszego przekazywania sygnału przez fosforylację kinaz, jak również poprzez modulowanie funkcjonalnych odpowiedzi poprzez fosforylację czynników transkrypcyjnych. Związana z MAPK kinaza białkowa-2 (MAPKAP-K2) i MAPKAP-K3 są aktywowane bezpośrednio przez p38. MAPk, a oni z kolei mogą fosforylować białko szoku cieplnego 27 (HSP27) (3, 6, 12). Czynniki transkrypcyjne bezpośrednio fosforylowane przez p38. MAPK obejmują aktywowany czynnik transkrypcyjny-2 (ATF-2), białko pomocnicze czynnika odpowiedzi na surowicę i czynnik 2C wzmacniacza miocytu (13, 14). Większość naszego zrozumienia transdukcji sygnału w komórkach eukariotycznych wzrosła z eleganckich badań transfekcji w liniach komórkowych. Istnieją jednak znaczne różnice między aktywacją szlaków sygnałowych w neutrofilach w porównaniu z monocytami lub liniami komórkowymi (13, 15). Jako krótkotrwałe, terminalnie zróżnicowane komórki pierwotne, neutrofile wykorzystują szybkie odpowiedzi niezależne od mechanizmów transkrypcyjnych lub translacyjnych, a także ograniczony repertuar funkcji syntetycznych. Szybkie reakcje na LPS obejmują montaż aktyny i przestrzeganie zaleceń
[patrz też: solarium tychy, właściwości olejku rycynowego, tabletki na nerwy bez recepty ]
[przypisy: przepis na chleb bez zakwasu, choleryk z brooklynu cda, tabletki na nerwy bez recepty ]